關(guān)鍵詞：SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體, SLC Transporter, OATP1B1, OATP1B3, MATE1, MATE2-K, OAT1, OAT3, OCT2, ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體，ABC Transporter, MDR1(P-gp), BSEP, BCRP, HEK293, MOCK

01    藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體簡(jiǎn)介

藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體是以藥物為基質(zhì)，存在于組織或器官的細(xì)胞膜表面，擔(dān)當(dāng)藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能的蛋白質(zhì)的總稱(chēng)。藥物在體內(nèi)的過(guò)程包括吸收、分布、代謝、排泄，多種藥物及外源性分子通過(guò)細(xì)胞膜主要是由藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體來(lái)控制。腎臟、肝臟和腸道是藥物代謝的主要器官，藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體廣泛表達(dá)于肝細(xì)胞、腸細(xì)胞和腎小管細(xì)胞膜之上。根據(jù)對(duì)底物的轉(zhuǎn)運(yùn)方向，主要將轉(zhuǎn)運(yùn)體分為攝入轉(zhuǎn)運(yùn)體和外排轉(zhuǎn)運(yùn)體。根據(jù)轉(zhuǎn)運(yùn)體結(jié)構(gòu)不同，將其分為三磷腺苷結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)體——ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體（ABC Transporter）及溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白——SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體（ SLC Transporter）兩類(lèi)，前者直接利用ATP分解產(chǎn)生的能量來(lái)進(jìn)行物質(zhì)的膜轉(zhuǎn)運(yùn)，后者利用細(xì)胞內(nèi)外電化學(xué)電位差或離子梯度提供能量跨膜運(yùn)輸?shù)孜铩?/p>

表1.部分ABC和SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體分布及底物特點(diǎn)

其中，因此，在體外研究該轉(zhuǎn)運(yùn)體家族同藥物的相互作用至關(guān)重要，本文將簡(jiǎn)要闡述OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

02    OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基礎(chǔ)介紹

OATP1B1是OATP家族中的重要成員，其特異性表達(dá)于肝細(xì)胞的基底側(cè)膜，在肝細(xì)胞吸收和清除陰性或兩性有機(jī)化合物的過(guò)程中扮演者不-可或-缺的角色，其底物具有廣泛特異性，包括非結(jié)合型膽紅素、膽汁酸、甲狀腺激素等; 其介導(dǎo)的臨床常用藥物；也包括他汀類(lèi)降脂藥物、抗腫瘤藥物、降糖藥、抗高血壓藥、抗病毒-藥、抗生素等。

?? 基因符號(hào) 

SLCO1B1

 ?? 底物 

阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅舒伐他汀、辛伐他汀酸、依那普利、非索非那定、甲氨蝶呤、纈沙坦、波生坦、奧美沙坦、阿曲生坦、利福平、SN-38、伊立替康、頭孢托侖、瑞格列奈、西羅莫司、殺奎那韋、洛匹那韋、頭孢哌酮、頭孢唑林及托拉塞米

 ?? 抑制劑 

環(huán)孢素、吉非貝齊、利福平、羅紅霉素、泰利霉素、利托那韋、殺奎那韋、奈非那韋、西-地那-非、阿托伐他汀酸、辛伐他聽(tīng)、辛伐他汀酸、阿托伐他汀酯、洛伐他汀、洛伐他汀酸、格列本脲、貫葉金絲桃素、紫杉醇、瑞格列奈、替米沙坦、他克莫司、曲格列酮

 ?? 誘導(dǎo)劑 

雙氯芬酸、布洛芬、羅美昔布

資料來(lái)源：有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1、OATP1B3 的基因多態(tài)性及其介導(dǎo)的藥物相互作用研究進(jìn)展[3]

OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在臨床當(dāng)中聯(lián)合用藥較為常見(jiàn)，如降血脂他汀類(lèi)藥物和抗高血壓、抗生素、抗病毒等多種藥物聯(lián)合使用，而其中一些藥物的使用可能會(huì)抑制OATP1B1的功能，從而導(dǎo)致他汀類(lèi)藥物過(guò)多地暴露于血液中，引發(fā)潛在橫紋肌溶解以及生命危險(xiǎn)等嚴(yán)重后果。由于其重要作用，F(xiàn)DA和EMA推薦體外測(cè)試用于評(píng)估OATP1B1參與的潛在藥物-藥物相互作用（drug-drug interaction, DDI）。OATP1B1功能的改變可能會(huì)對(duì)肝臟內(nèi)藥物代謝的藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)以及藥物之間的相互作用產(chǎn)生影響[3]。

OATP1B1 具有多個(gè)有功能意義的遺傳突變，可引起其轉(zhuǎn)運(yùn)底物代謝的個(gè)體差異。OATP1B1 由SLCO1B1 基因編碼，定位于12p21.2，全長(zhǎng)10.86 kb，包括14 個(gè)外顯子，編碼 691 個(gè)氨基酸。OATP1B1 具有高度遺傳多態(tài)性，且已發(fā)現(xiàn)多個(gè)具有功能意義的突變型，其中較常見(jiàn)的兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性( single-nucleotide polymorphisms，SNPs) 為4 號(hào)外顯子c.388A ＞ G( rs2306283 ) 和5 號(hào)外顯子c.521T ＞ C( rs4149056 ) ，在中國(guó)人中突變頻率分別為73.4% 和14.0%。由其組成的單倍型為* 1a( c.388A + c.521T) 、* 1b( c.388G + c.521T) 、* 5( c.388A + c.521C) 、* 15( c.388G + c.521C) ，其中* 1b 和* 15 在中國(guó)人中的突變頻率分別為59.9%和14.0%。目前已證實(shí)了OATP1B1 遺傳多態(tài)性對(duì)臨床應(yīng)用藥物具有影響：

【1】c.521T ＞ C 突變導(dǎo)致OATP1B1 轉(zhuǎn)運(yùn)活性降低已得到公-認(rèn)，但c.388A ＞ G 突變的功能還存在一些爭(zhēng)議。在單倍型* 5、* 15 中OATP1B1 轉(zhuǎn)運(yùn)功能均降低，其底物藥的血藥濃度增加。

【2】g. -11187G ＞ A 突變發(fā)生在SLCO1B1 啟動(dòng)子區(qū)域，與c.521T ＞ C 存在連鎖不平衡，但在日本人群中的研究發(fā)現(xiàn)，這一突變并不引起肝臟中mＲNA 表達(dá)的改變。

【3】c. 1877 T ＞ A SNP能導(dǎo)致密碼子終止，但這一突變只在中國(guó)人群中被發(fā)現(xiàn)。其它的SNP 突變研究相對(duì)較少，其功能意義也不明顯。

因此，研究OATP1B1對(duì)藥物的聯(lián)合使用及定向研發(fā)用藥均具有重要意義！ 

03    IPHASE轉(zhuǎn)運(yùn)體相關(guān)產(chǎn)品

鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，以HEK293為細(xì)胞載體，成功構(gòu)建瞬時(shí)轉(zhuǎn)染重組OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)體。IPHASE技術(shù)人員以終濃度為1 μM的普伐他汀鈉（Deoxycholic acid， sodium salt）為底物，通過(guò)LC-MS/MS檢測(cè)空載MOCK細(xì)胞HEK293和SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體(SLC Transporter)細(xì)胞OATP1B1對(duì)普伐他汀鈉的轉(zhuǎn)運(yùn)能力，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞OATP1B1底物轉(zhuǎn)運(yùn)量為MOCK對(duì)照HEK293細(xì)胞底物轉(zhuǎn)運(yùn)量的13倍，遠(yuǎn)高于《藥物相互作用指導(dǎo)原則2020》[1]規(guī)定的2倍，表明OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞模型構(gòu)建成功！

除瞬時(shí)轉(zhuǎn)染重組OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)體細(xì)胞，IPHASE相繼開(kāi)發(fā)出了多種SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體（SLC Transporter）細(xì)胞和ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體（ABC Transporter）囊泡相關(guān)新產(chǎn)品，包含OATP1B3, MATE1, MATE2-K, OAT1, OAT3, OCT2, MDR1(P-gp), BSEP, BCRP, HEK293, MOCK等供客戶(hù)自行選擇，以滿(mǎn)足不同客戶(hù)的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體研究。

參考資料：

[1]: 《藥物相互作用指導(dǎo)原則2020》.

[2]: 有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1遺傳多態(tài)性與個(gè)體化用藥.

[3]: 有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1、OATP1B3 的基因多態(tài)性及其介導(dǎo)的藥物相互作用研究進(jìn)展。